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58 「チフス」菌体内毒素
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素特に、「チフス」菌、「ペスト」菌及び赤痢菌の菌体内毒素の物理学的及び生
物学的性質を更によく検査することが出来る。
之等の研究に次いで、種々の学者は同じ方法を他の菌体内毒素の抽出に摘
用した。例へば、Bordet et Gengou は百日咳の球菌様桿菌の菌体内毒素を
得た; P,N,Bernard はマルタ熱菌のそれを、Slatineano は「インフルエンザ」
の球菌様桿菌のそれを、Cruveilhier は淋菌のそれを得た。
主なる菌体内毒素を逐次述べて後、レフレル氏菌、糸状菌、Prodigiosus 及
び Sarcina lutea で造れる多少有毒なる抽出物につき数言述べやう。
「チフス」菌体内毒素
Endotoxine Typhique
すべて吾人の実験の出発点に使用せる「チフス」菌は、「チフス」病の極期に、
患者の血液より分離したのである。この菌は決して動物通過をしなかつたも
のである。海猽に対する本菌の毒力は少しも変化しなかつた: 寒天に24時
間培養の 1∖7 を腹腔内に注射し350瓦の海猽を殺した。60°に加熱し、次に
真空内に乾燥する時は10―15mg の分量にて海猽は斃れる。
「チフス」菌体内毒素を遊離するために、吾人は先づ乾燥菌(15 Centigr,)食
塩水(2cc,)]及び正常馬血清(2cc)の混合を造つた。「チフス」菌は間もなく血清
により凝集される、二時間接触せる後に、之を遠心沈澱した。
遠心沈澱の前では、混合物の毒性ある部は始めに加へたる乾燥菌のそれで
あつて、液体の部は毒性がなかつた。遠心沈澱の後は、二層の各の毒性は反
対となつた。即ち、細菌体は血清と生理的食塩水とを接触せる後には、殆ど
毒性がなくなつた: 処置せざる菌の10―15mgの菌量で斃れる海猽は、処
置せる菌の 10 Centigr, まで何の障害なく耐えた。他方に於て、混合物の液
体の部分は、始め血清と生理的食塩水より成り、その時は全く無毒であつた
ものが、有毒となり、1,5cc, の腹腔内注射にて、300瓦の海猽は斃れた。
「チフス」菌体内毒素 59
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即ち次の如き事が起つたのである: 「チフス」菌はその内容の一部を瀰撒
せしめた; この瀰撒のお蔭で、二つの新物質が造られた: 一部は無毒なる
「チフス」菌であり、他部は溶解性「チフス」菌体内毒素である。
＊ ＊ ＊
吾人は曩に Macfadyen et Rowland の抽出法の原理を述べた。之は菌を
凍結させ極めて強力なる杵を用ひ低温で粉砕するのである。液体空気を注ぎ
固い塊となれる細菌を液体空気の中で二時間粉砕する。操作の終りに、乳鉢
内に細菌の残骸よりなる半流動体の「パテー」を得。
出発点にて使用せる培養はたとへ生きて居り毒素が強くとも、最終の粉砕
物は無菌状態である。零点下190°なる液体空気の温度は無菌となすことが
出来ないのであるから、英国の学者たち(上記の著者等)は之は細菌の粉砕及び
寸断の結果なりと結論してゐる。
上記の方法にて採取し次いで細菌残査【渣】を遠心沈澱により除去せる細胞汁は
溶解性の「チフス」菌体内毒素を示す。
Macfadyen et Rowland によれば、この菌体内毒素は極めて活動的である;
之は使用せる菌が始めに毒力強き程毒性が強い。該菌体内毒素は腹腔内注射
に於て１cc,―0,5cc, の分量で3―4時間に海猽を殺すことが出来る。著者等
は常に本法は極めて骨の折れるもので、いつも甚だ活動的なる製剤を得るも
のでないことを記載してゐる; 屡々何故か正確には分らぬが、細胞汁は余り
毒性のないことがある。
Macfadyen et Rowland の方法は、確かに、甚だ天才的である; 之はすべ
ての研究室で出来るものではない。
＊ ＊ ＊
吾人が1906年に記載せる菌体内毒素の抽出方法は、特別の装置を必要とし
ない; 之は吾人が以前に更に重要なる生産能率を与ふるために使用した方法
に優つてゐる。
此所に此の技術を記載することにしやう。
本法は今日では「ペスト」、赤痢、百日咳、マルタ熱「インフルエンザ」等の
現代語訳
58 チフス菌細菌内毒素
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素、特に、チフス菌、ペスト菌及び赤痢菌の細菌内毒素の物理学的及び生物学的性質をさらによく検査することができる。
これらの研究に次いで、種々の学者は同じ方法を他の細菌内毒素の抽出に適用した。例えば、ボルデとジャング（Bordet et Gengou）は百日咳の球菌様桿菌の細菌内毒素を得た；P.N.ベルナールはマルタ熱菌のそれを、スラティネアノはインフルエンザの球菌様桿菌のそれを、クルヴェイリエは淋菌のそれを得た。
主要な細菌内毒素を逐次述べた後、レフレル氏菌、糸状菌、プロディジオーサス及びサルシナ・ルテアで作られる多少有毒な抽出物について数言述べよう。
チフス菌細菌内毒素
Endotoxine Typhique
すべて我々の実験の出発点に使用したチフス菌は、チフス病の極期に、患者の血液より分離したのである。この菌は決して動物通過をしなかったものである。海猽に対する本菌の毒力は少しも変化しなかった：寒天に24時間培養の1/7を腹腔内に注射し350グラムの海猽を殺した。60°に加熱し、次に真空内に乾燥する時は10―15mgの分量にて海猽は死ぬ。
チフス菌細菌内毒素を遊離するために、我々はまず乾燥菌（15センチグラム）、食塩水（2cc）及び正常馬血清（2cc）の混合を作った。チフス菌は間もなく血清により凝集される。二時間接触させた後に、これを遠心沈殿した。
遠心沈殿の前では、混合物の毒性ある部分は始めに加えた乾燥菌のそれであって、液体の部分は毒性がなかった。遠心沈殿の後は、二層の各々の毒性は反対となった。すなわち、細菌体は血清と生理的食塩水とを接触させた後には、ほとんど毒性がなくなった：処置しない菌の10―15mgの菌量で死ぬ海猽は、処置した菌の10センチグラムまで何の障害なく耐えた。他方において、混合物の液体の部分は、始め血清と生理的食塩水より成り、その時は全く無毒であったものが、有毒となり、1.5ccの腹腔内注射にて、300グラムの海猽は死んだ。
チフス菌細菌内毒素 59
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すなわち次のようなことが起こったのである：チフス菌はその内容の一部を放散させた；この放散のおかげで、二つの新物質が作られた：一部は無毒なチフス菌であり、他部は溶解性チフス菌細菌内毒素である。
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我々は以前にマクファディエンとローランド（Macfadyen et Rowland）の抽出法の原理を述べた。これは菌を凍結させ極めて強力な杵を用いて低温で粉砕するのである。液体空気を注ぎ固い塊となった細菌を液体空気の中で二時間粉砕する。操作の終わりに、乳鉢内に細菌の残骸よりなる半流動体のパテを得る。
出発点において使用した培養はたとえ生きており毒素が強くとも、最終の粉砕物は無菌状態である。零点下190°なる液体空気の温度は無菌とすることができないのであるから、英国の学者たち（上記の著者等）はこれは細菌の粉砕及び寸断の結果なりと結論している。
上記の方法にて採取し次いで細菌残渣を遠心沈殿により除去した細胞汁は溶解性のチフス菌細菌内毒素を示す。
マクファディエンとローランドによれば、この細菌内毒素は極めて活動的である；これは使用した菌が始めに毒力強いほど毒性が強い。該細菌内毒素は腹腔内注射において1cc―0.5ccの分量で3―4時間に海猽を殺すことができる。著者等は常に本法は極めて骨の折れるもので、いつも甚だ活動的な製剤を得るものでないことを記載している；しばしば何故か正確には分からないが、細胞汁はあまり毒性のないことがある。
マクファディエンとローランドの方法は、確かに、甚だ天才的である；これはすべての研究室でできるものではない。
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我々が1906年に記載した細菌内毒素の抽出方法は、特別の装置を必要としない；これは我々が以前にさらに重要な生産能率を与えるために使用した方法に優っている。
ここにこの技術を記載することにしよう。
本法は今日ではペスト、赤痢、百日咳、マルタ熱、インフルエンザ等の
英語訳
58 Typhus Bacterial Endotoxins
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toxins, particularly the physical and biological properties of bacterial endotoxins from typhus bacteria, plague bacteria, and dysentery bacteria can be examined much better.
Following these studies, various scholars applied the same method to the extraction of other bacterial endotoxins. For example, Bordet and Gengou obtained bacterial endotoxins from coccoid bacilli of pertussis; P.N. Bernard obtained those from Malta fever bacteria, Slatineano obtained those from coccoid bacilli of influenza, and Cruveilhier obtained those from gonococci.
After sequentially describing the major bacterial endotoxins, let us say a few words about the somewhat toxic extracts made from Löffler's bacillus, filamentous bacteria, Prodigiosus, and Sarcina lutea.
Typhus Bacterial Endotoxins
Endotoxine Typhique
All typhus bacteria used as the starting point of our experiments were isolated from patients' blood at the height of typhoid disease. These bacteria never underwent animal passage. The virulence of these bacteria against guinea pigs did not change at all: injecting 1/7 of a 24-hour agar culture intraperitoneally killed a 350-gram guinea pig. When heated to 60° and then dried in vacuum, guinea pigs die with a dose of 10-15 mg.
To release typhus bacterial endotoxins, we first made a mixture of dried bacteria (15 centigrams), saline solution (2cc), and normal horse serum (2cc). The typhus bacteria are soon agglutinated by the serum. After two hours of contact, this was centrifuged.
Before centrifugation, the toxic part of the mixture was that of the dried bacteria added initially, and the liquid part was not toxic. After centrifugation, the toxicity of each of the two layers became opposite. That is, the bacterial bodies became almost non-toxic after contact with serum and physiological saline: guinea pigs that died with 10-15 mg of untreated bacteria could tolerate up to 10 centigrams of treated bacteria without any harm. On the other hand, the liquid part of the mixture, which initially consisted of serum and physiological saline and was completely non-toxic at that time, became toxic, and a 300-gram guinea pig died with an intraperitoneal injection of 1.5cc.
Typhus Bacterial Endotoxins 59
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That is, the following occurred: typhus bacteria released part of their contents; thanks to this release, two new substances were created: one part is non-toxic typhus bacteria, and the other part is soluble typhus bacterial endotoxins.
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We previously described the principle of Macfadyen and Rowland's extraction method. This involves freezing bacteria and grinding them at low temperature using an extremely powerful pestle. Bacteria that have become solid lumps by pouring liquid air are ground in liquid air for two hours. At the end of the operation, a semi-fluid paste consisting of bacterial debris is obtained in the mortar.
Even if the culture used at the starting point is alive and has strong toxins, the final ground product is sterile. Since the temperature of liquid air at -190° cannot sterilize, British scholars (the above authors) conclude that this is the result of bacterial grinding and fragmentation.
The cell juice obtained by the above method and then removing bacterial residue by centrifugation shows soluble typhus bacterial endotoxins.
According to Macfadyen and Rowland, this bacterial endotoxin is extremely active; the stronger the virulence of the bacteria used initially, the stronger its toxicity. This bacterial endotoxin can kill guinea pigs in 3-4 hours with doses of 1cc-0.5cc by intraperitoneal injection. The authors always describe that this method is extremely laborious and does not always yield very active preparations; often, for reasons not precisely understood, the cell juice may have little toxicity.
Macfadyen and Rowland's method is certainly very ingenious; it cannot be done in all laboratories.
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The bacterial endotoxin extraction method we described in 1906 does not require special equipment; it is superior to the method we previously used to provide more important production efficiency.
Let us describe this technique here.
This method is now used for plague, dysentery, pertussis, Malta fever, influenza, and other